4. 二元高压梯度系统与四元低压梯度系统
二元高压梯度系统和四元低压梯度系统的流路分别见下图：
二元高压梯度系统
四元低压梯度系统
从图中可以直观的看出：
1） 二元高压梯度系统有两个泵，四元低压梯度系统有一个泵；
2） 二元高压梯度系统是泵后混合流动相（高压混合），四元低压梯度系统是泵前混合流动相（低压混合）；
3） 二元高压梯度系统的阻尼器在泵后的三通后边，四元低压梯度系统的阻尼器在泵的两个柱塞杆之间；
4） 二元高压梯度系统最后边有混合器，四元低压梯度系统泵前有比例阀。
理论上说二元高压梯度系统的混合比例是通过改变泵的流速来获得的，其流量控制精度更高，混合室在泵后，高压下混合效率也高很多、梯度组成精确。四元低压梯度系统的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的，理论上混合的比例也是准确的。
在梯度洗脱中，梯度延迟体积非常重要，特别是复杂样品的分析，低的延迟体积具有更快的梯度响应时间，同一样品在同一色谱柱上能够获得更好的分辨率。二元高压的延迟体积是从混合器后开始计算的，而四元低压是从比例阀混合部分开始计算的，多出了泵的死体积、泵到比例阀的管线和泵到混合器的管线，所以四元低压的梯度延迟梯度较二元高压要大，梯度响应慢。
流动相都会溶解一定的气体，二元高压梯度系统是泵后混合，气体的溶解度随压力的增大而增大，所以二元高压混合不会产生气泡。而四元低压梯度系统是泵前混合，在常压下进行的，两种液体混合时，会降低气体在混合溶液中的溶解度，通常会有气泡产生，所以四元低压梯度系统一定要配在线真空脱气机。
二元高压梯度系统的不足就是只能同时使用两种流动相，而四元低压梯度系统同时可以使用四种流动相，但通常的样品分离，两种流动相的梯度洗脱足可以解决问题，最新的药典上的分析方法也几乎没有超过两种流动相的梯度。从价格上比较，一个泵的成本要比一个四元比例阀高很多。
